L'Ambasciata di Spagna presso la Santa Sede è considerata la più antica sede diplomatica permanente del mondo.  Affittato nel 1622 e acquistato nel 1647 il Palazzo di Spagna è l’immobile storicamente più importante del servizio esterno spagnolo.

La decisione spagnola di affittare e poi comprare una sede permanente, nella quale l'Ambasciata rimane tuttora dopo più di 400 anni, fu una decisione politica pionieristica. Fin dall'inizio, l'Ambasciata di Spagna presso lo Stato Pontificio servì sotto molti aspetti come modello di quello che sarebbe stato lo stile della presenza diplomatica europea nella Roma papale del XVI, XVII e XVIII secolo, dando così il nome a una delle piazze più emblematiche di Roma e del mondo.

L'ambasciata ospita un'importante collezione di mobili e opere d'arte. Il mobilio è per lo più risalente al XVIII e XIX secolo, con consolle di marmo antico e lampadari di particolare importanza.

I dipinti che ora sono appesi alle pareti del Palazzo testimoniano gli stretti legami tra l'ambasciata presso la Santa Sede e i monarchi spagnoli.  A partire dal ritratto di Carlo III di Rafael Mengs, passando per i ritratti anonimi di Carlo IV e sua moglie Maria Luisa di Parma, l'emblematico ritratto di Fernando VII di Vicente López, il grande ritratto della regina Isabella II di Federico de Madrazo e i due ritratti di Alfonso XIII, uno da bambino di Vicente Palmaroli e l'altro vestito da Gran Maestro degli ordini di Santiago, Montesa, Alcántara e Calatrava di Julio Moises.